Western blot 北京龙方科技

蛋白电泳问题处理

蛋白电泳中经常出现的问题和解决方法

1：“微笑”(两边翘起中间凹下)形带，Western blot哪家好，主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所

致，多出现于较厚的凝胶中。     处理办法：待其充分凝固再作后续实验。

2： “皱眉”(两边向下中间鼓起)形带

主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。

处理办法：在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。

3：出现拖尾现象?

主要是样品融解效果不佳、样品降解或分离胶浓度过大引起的。

处理办法：加样前离心;选择适当的样品缓冲液；电泳缓冲液时间过长，重新配制

4：电泳的条带很粗?

电泳中条带很粗是常见的事，主要是未浓缩的原因。

处理办法：适当增加浓缩胶的长度;  保证浓缩  胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压

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转印电泳

   转印电泳AG与LG反应的特点：特异性、比例性、可逆性

1，特异性：由抗原决定簇和LG分子的超变区之间空间结构的互补性确定的。

2，比例性：抗原与LG发生反应需遵循一定的量比关系。

3，可逆性：抗原LG结合形成复合物后，在一定条件下又可解离恢复为抗原与LG的特性。

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蛋白质进行PAGE时，Western blot，常用垂直板电泳。

垂直板电泳的优越性有：

a.表面积大而薄，便于通冷却水以降低热效应，条带更清晰。

b.在同一块胶板上可同时进行10个以上样品的电泳，便于在同一条件下比较分析鉴定，还可用于印迹转移电泳及自显影。

c.胶板制作方便，易剥离，样品用量少，分辨率高，不仅可用于分析，还可用于制备。

d.胶板薄而透明，电泳染色后可制成干板，便于长期保存与扫描。

e.可进行双向电泳。

龙方科技以诚信为首 ，服务至上为宗旨。公司生产、销售电泳槽，公司拥有强大的销售团队和经营理念。想要了解更多信息，赶快拨打图片上的热线电话！

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