电泳的基本原理
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物质分子在正常情况下一般不带电,即所带正负电荷量相等,故不显示带电性。分子生物实验电泳槽使用方法北京龙方科技为您提供信息如下,希望能对您有所帮助。但是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质,由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。
若将带净电荷Q的粒子放入电场,则该粒子所受到的电荷引力为:
F引=E Q (16-1)
在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻
F阻=6πrηV (16-2)
当F引=F阻时
EQ= 6πrηV
V = EQ/6πrη (16-3)
由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电场强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶液的粘度(η)成反比。
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许多生物分子都带有电荷,在电场作用下可发生移动。由于混合物中各组分所带电荷性质、数量以及分子量各不相同,使在同一电场作用下,各组分的泳动方向和速度也各有差异,所以在一定时间内,它们移动距离不同,从而可达到分离鉴定的目的。
电泳的分类
电泳可分为显微电泳,自由界面电泳和区带电泳三种,其中区带电泳操作简便,容易推广,因此常用于分离鉴定。因为电泳技术的这种独特功能,所以就成了分子生物学研究工作中不可缺少的重要分析手段,被广泛应用于基础理论研究、农业科学、工业生产、法医学和商检等许多领域。区带电泳又称区域电泳,即电泳在不同的惰性支持物中进行,使各组分成带状区间。区带电泳的形式,仅按某一特点分类似乎都不全方面。这里基于支持物的物理性状、装置形式、pH值的连续性等不同,可分为:
(一)按支持物物理性状
1. 滤纸及其它纤维素薄膜电泳 如纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳。
2. 凝胶电泳 如琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳,制成凝胶板或凝胶柱。
3. 粉末电泳 如纤维素、淀粉、琼脂粉等,将粉末与适当的溶剂调和,铺成平板。
4. 线丝电泳 如尼龙丝、人造丝电泳,是一类微量电泳。
(二)按支持物的装置形式
1. 平板式电泳 电泳支持物(如凝胶)制成水平板状。
2. 垂直板式电泳 板状支持物,在电泳时,按垂直方向进行。
3.连续—流动电泳 首先应用于纸电泳,将滤纸垂直竖立,两边各放一电极,缓冲液和样品自顶端下流,与电泳方向垂直。也可以用其它材料作支持物。该法主要用途是制备一定量的电泳纯物质。
4.圆盘电泳 电泳支持物灌制在两通的玻璃管中,被分离的物质在其中泳动后,区带呈圆盘状。
(三)按pH的连续性
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